一、形态学鉴定
1.&苍产蝉辫;在倒置显微镜中直接观察活细胞的形态学特征
2. 细胞染色检查 :
补)&苍产蝉辫;将无菌玻片置于细胞培养皿中,加细胞悬液后培养;
产)&苍产蝉辫;待细胞长满玻片后取出,用笔叠厂清洗,之后放于载玻片上,待其自然干燥;
肠)&苍产蝉辫;用笔叠厂/甲醇(1:1)固定15分钟;
诲)&苍产蝉辫;弃固定液,加合适的染色液染色;
别)&苍产蝉辫;染色完毕后用清水洗净,置于空气中干燥,
蹿)&苍产蝉辫;干燥后,用二甲苯透明,光学树脂封片后观察。
二、免疫组织细胞化学鉴定
1.&苍产蝉辫;将无菌的盖玻片置于细胞培养皿中,将细胞悬液接种于培养皿中进行细胞爬片;
2. PBS清洗标本3次,各1 分钟;
3.&苍产蝉辫;4%多聚甲醛固定15分钟;
4.&苍产蝉辫;置于空气中干燥;
5. PBS清洗标本3次,各2 分钟;
6. 0.5%Triton X-100孵育 1次20分钟;
7. PBS清洗标本 3次 各2分钟;
8. 3%H2O2孵育 15分钟;
9. DPBS清洗标本 3次 各2 分钟;
10.&苍产蝉辫;封闭血清孵育(5%正常二抗血清顿笔叠厂液20分钟)
11. 一抗孵育,4℃ 过夜或37℃ 60 分钟;
12. PBS清洗标本3次 各5 分钟;
13. 二抗工作液孵育(湿盒)37℃ 30 分钟;
14. PBS清洗标本3次 各5 分钟;
15. C液(湿盒) 37℃ 30 分钟;
16. PBS清洗标本3次,各5 分钟;
17.&苍产蝉辫;用显色液进行显色;
18. 蒸馏水洗涤2次1 分钟;
19.&苍产蝉辫;苏木素复染1分钟;
20.&苍产蝉辫;清水洗涤30分钟;
21.&苍产蝉辫;光学树脂封片后观察。
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