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对于胎牛血清的7问7答

发布日期: 2022-12-19
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细胞培养中产颈产耻办别蝉丑补辞的就是胎牛血清,对于科研小伙伴们在使用胎牛血清中遇到的问题,小编整理了以下几点并进行了解答,一起来看看吧。

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蚕:血清应如何保存?


未拆封的血清应存放于 -15 ℃至 -20 ℃,避免反复冻融。拆封后的血清应无菌分装成一次的用量并存放于 -15 ℃至 -20 ℃,2~8 ℃ 溶解后建议尽快使用。


蚕:血清的有效期是多久?


大部分血清效期是 5 年,针对每个批次,请通过厂家质检确定具体效期日期。


蚕:血清应如何融解?


取出的血清置于 2~8 ℃ 融化,不时旋转混匀,充分融解后分装或使用。


蚕:血清中出现絮状沉淀是何原因?如何处理?


多种原因可能导致絮状沉淀的形成,最常见的原因之一是融化过程中,脂蛋白聚集所致。该现象一般不会影响产物质量。可以 400 g 离心 5 分钟,取上清,然后过滤。根据需要选择合适的滤膜孔径,一般常用的是 0.22 um PES 材质的滤膜。为避免滤膜阻塞,建议离心后取上清加入培养基内一起过滤而不是直接过滤血清。


蚕:为什么存放于冰箱中的血清会出现沉淀?如何避免


在 2~8°C 条件下存放,血清中的多种蛋白或脂蛋白会形成肉眼可见的沉淀,如血纤蛋白(fibrin),单体时处于溶解状态,在冻融过程中会发生聚集,形成肉眼可见的沉淀。但该现象一般不会影响血清的性能。可以 400 g 离心 5 分钟,取上清,然后过滤。根据需要选择合适的滤膜孔径,一般常用的是 0.22 um PES 材质的滤膜。为避免滤膜阻塞,建议离心后取上清加入培养基内一起过滤而不是直接过滤血清。为尽量避免出现上述现象,建议血清分装成一次性用量存于 -15° 至 -20 ℃ 冰箱,避免反复冻融和融化后的血清在 2~8 °C 条件下长时间放置。


蚕:血清是否需要做灭活处理?


灭活过程中,会导致血清中某些成分被破坏,如氨基酸,维生素,生长因子等。所以只有在您的实验对血清有特殊要求时,才会考虑对血清进行灭活处理。如您的实验对血清中的某种组分敏感,需要去除该组分。最常见的情况是需要去除血清中的补体蛋白,因为补体在机体中参与细胞杀伤,巨噬细胞和淋巴细胞活化,肥大细胞和血小板组胺释放,平滑肌收缩等过程,所以一般在免疫学相关研究中及肌细胞和干细胞的培养过程中需要对血清进行灭活处理。


蚕:如何进行血清灭活处理?


先将血清融化和混匀,热灭活时请将其置于 56 ℃ 水浴 30 分钟。为尽量减少热灭活对血清品质的影响,一次灭活的血清体积不宜过大。最好准备同样的容器装相等体积的水(与血清相同温度),灭活时将装有血清和水的容器同时放入 56 ℃ 水浴, 在装水的容器中放置温度计,加热过程中不时轻轻旋转混匀血清,当温度计显示达到 56 ℃ 左右,开始计时。56 ℃ 水浴后,建议马上转移到冰上降温。


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