骋滨叠颁翱10010-147澳洲血源(热灭活)*
热灭活是指56℃, 30分钟加热已*解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显着增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。 骋滨叠颁翱10010-147澳洲血源(热灭活)* 问:我要做滋养细胞培养,Gibco北美胎牛血清要灭活吗? 答:一般的细胞培养中使用到的Gibco胎牛血清,例如Gibco ES胎牛血清是不用灭活的。如果一定需要灭活,可以直接购买Gibco胎牛血清澳洲热版本,进口Gibco澳洲胎牛血清热灭活的一般都已灭活。灭活的Gibco血清价格一般比未灭活的Gibco血清价格要高很多。 对于血清的热灭活,是很多人感兴趣也存在一定争议的话题。大多数实验室将血清的热灭活还是作为常规来执行,因为有两个作用,*是灭活补体,第二是灭活血清中可能存在的支原体。但是实验者并没有考虑热处理对血清中的生长因子、氨基酸等成分带来的负面影响。 我在实验室处理Gibco胎牛血清新西兰的时候,有一次水浴箱在灭活过程中出现故障,温度升高到80℃,血清变成了凝胶状,我重新处理了另外一份Gibco胎牛血清南美,将两份血清对比,发现高温直接影响到血清所含的抗体蛋白。在56℃下灭活半小时以上,肯定也会对里面的蛋白起到破坏作用。下次有机会我做个延长灭活时间的实验试试,看看到底有多大的影响。热灭活之后,血清放在四度冰箱久了,就会有沉淀产生,这常常会被认为是微生物污染或者是黑胶虫污染。为了验证到底有没有污染,常常又会把血清放置37℃温育,但是血清中的蛋白会进一步析出,后还是要做镜检,无菌培养试验,和革兰氏染色试验,非常麻烦。
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