Life AmnioMAX - II Complete Medium11269-016
【检验原理】通过穿刺术获得羊水胎儿脱落细胞或绒毛膜细胞,使用该培养基培养增殖后,提供后续检测,如染色体核型分析。
【主要组成成分】基础培养基、牛血清、谷氨酰胺、&苍产蝉辫;抗生素。
【适应范围】羊水细胞及绒毛膜细胞体外增殖培养。
【储存条件及有效期】
Life AmnioMAX - II Complete Medium11269-016
培养基应贮存在-20℃,有效期为2年,溶解后应存放于2-8℃,并于1周内使用。 存放及使用时注意避光。
【生产日期与失效日期】详见产物标签
【使用仪器】显微镜、二氧化碳细胞培养箱、离心机
【样本要求】新鲜羊水细胞或绒毛膜细胞
【检验方法】
采用如下方法做羊水细胞原位培养或按其它常规羊水细胞培养方法培养羊水细胞:
1. 取羊水20ml, 以120xg离心十分钟。
2. 在无菌操作台操作,弃上清液.
3. 加入2ml羊水培养基,轻轻 混匀,制成细胞悬液。
4. 取35mm培养皿,在盖子上面及下半部侧壁都做好标记(包括编号、姓名、日期等)。
5. 滴加0.5ml细胞悬液至培养皿中的盖玻片(25px2)中央,用移液管尖小心摊开。注意液体不能流出盖玻片。
6. 将培养皿置于5% CO2、湿度饱和的37度培养箱进行培养。
7. 24小时后,给每块盖玻片补加1.5ml培养基。
8. 接种7天后观察细胞。当发现盖玻片上细胞克隆数大于10个,每个克隆细胞数大于300且克隆边沿细胞呈旺盛分裂状态时,即可收获细胞。否则,继续培养1~2天。当克隆边沿细胞融合度大于90%,呈现停止分裂状态时,意味细胞已经老化,不适合用作分析。
9. 适合收获的细胞按常规方法使细胞分裂停止在有丝分裂中期并制作细胞片,经吉姆萨染色处理后做染色体核型分析。
【参考值(参考范围)】细胞倍增指数大于2
【检验结果的解释】细胞培养时间、加入秋水仙酰胺的量以及低渗操作时间对结果影响较大,如发现制片所得的分裂相较少,需要对实验条件及样品进行确认。
【检验方法的局限性】仅用于羊水细胞、绒毛膜细胞培养。
【产物性能指标】
1. 装量差异限度:±3%
2. 澄清度:澄清
3. PH值:7.0-7.5
4. 渗透压(mOsm/kg):280-330
5. 无菌检测:无菌
6. 内毒素(EU/ml):<10
7. 细胞生长实验:细胞倍增指数大于2
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